SARS-CoV刺突蛋白受体结合区的表达及高潜在中和性人源抗体的制备
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R511

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此课题受"973"项目资助(项目号2003CB514127)


Expression of Receptor-binding Domain of SARS-CoV Spike Protein and Isolation of Highly Potent Neutralizing Antibody
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    为表达SARS-CoV刺突蛋白S(Spike)受体结合区(RBD)并从中筛选高潜在中和性人源抗体,我们用原核表达并纯化的SARS-CoVSRBD进行抗体库的筛选。从多个曾患SARS的健康人血中获得淋巴细胞,PCR扩增全部抗体基因,插入Pcomb3x载体中,构建抗SARS病毒人源噬菌体抗体库。利用噬菌体表面呈现技术,从中筛选结合SARS-CoVSRBD的人源抗体并用ELISA及Westernblot鉴定阳性克隆,竞争ELISA检测人源抗体阻断SARS-CoVSRBD与其受体ACE2的结合情况。结果为构建了库容量6.2×107的免疫Fab噬菌体抗体库,重组率为75%,从中筛选获得9株特异抗SARS-CoVSRBD的人源Fab抗体,ELISA及Westernblot检测均为阳性。其中有一株能阻断SARS-CoVSRBD与其受体ACE2的结合。本实验结果表明:人源抗SARS-CoVSRBD基因工程抗体的获得,一方面将对SARS疾病的特异性预防,治疗和诊断提供新的途径,同时也提示SARS-CoV亚单位疫苗可以用于SARS疾病的预防。

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引用本文

李郁 姚西英 杨勇 陈江浩 张思河 宋斐 包国强 杨向民 陈志南. SARS-CoV刺突蛋白受体结合区的表达及高潜在中和性人源抗体的制备[J]. 科学技术与工程, 2005, (14): 939-943.
LI Yu, YAO Xiying, YANG Yong, et al. Expression of Receptor-binding Domain of SARS-CoV Spike Protein and Isolation of Highly Potent Neutralizing Antibody[J]. Science Technology and Engineering,2005,(14):939-943.

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  • 最后修改日期:2005-05-13
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