S794.1
国家自然科学基金(39760064)资助
用改良 CTAB 法提取巴西橡胶树幼嫩叶片总 DNA,通过限制性内切酶 Sau3A 不完全酶切,回收并纯化后得到15~23 kb 的 DNA 片段。以来源于λ噬菌体的 EMBL3为载体 DNA,用T_4DNA 连接酶将载体与 DNA 片段连接成为重组 DNA。经体外包装形成完整的噬菌体颗粒,转染受体菌E.coli LE392,在 LB 平板培养基上获得重组子的效率为1.1×10~6个/μg DNA,达到构建文库的要求。随机挑取一定数量的克隆子,酶切分析结果发现有88%的克隆子携带外源 DNA。
张桂和,徐碧玉,金志强,等. 巴西橡胶树基因组文库的构建[J]. 科学技术与工程, 2002, (6): 40-43.ZHANG Guihe XU Biyu JIN Zhiqiang LU Xiangyang LUO Zemin. The Construction of Genomic Library of Hevea brasiliensis[J]. Science Technology and Engineering,2002,(6):40-43.